Онкология-

Б.П.Копнин

Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва

источник RosOncoWeb.Ru

01 0203 0405 0607
3.11. Мутаторные гены

Нарушения функций вышерассмотренных белков, контролирующих апоптози/или клеточный цикл (p53, pRb, p16INK4a, pARF и др.) отменяютзапрет на пролиферацию клеток с различными аномалиями, в том числеи с генетическими изменениями, что увеличивает вероятность появленияонкогенных клеточных клонов. Эту группу белков принято называть"gatekeepers" - "сторожи". Наряду с этим идентифицированряд компонентов специализированных систем распознавания и репарацииповреждений ДНК, дисфункция которых также вызывает генетическуюнестабильность, предопределяющую развитие новообразований. Ониполучили название "caretakers" - "смотрители".Эта вторая группа белков и является предметом рассмотрения данногораздела.

В зависимости от типа повреждений ДНК могут активироваться тритипа репарационных систем: а) системы репарации двунитевых разрывовДНК- б) системы репарации неспаренных оснований ("mismatchrepair")- и, в) системы эксцизионной репарации. Описаны наследственныеформы новообразований, связанные с врожденными мутациями генов,продукты которых обеспечивают активацию и функционирование каждойиз этих систем. Причем, некоторые из этих белков (ATM, CHK2, р53,BRCA1) активируют также и молекулы, ответственные за остановкуклеточного цикла и индукцию апоптоза, выполняя, таким образом,одновременно функции и "смотрителя", и "сторожа".

3.11.1. АТМ, ATR, NBS1, CHK1 и CHK2 - компоненты систем проведениясигналов от поврежденной ДНК к различным эффекторам

Ключевую роль в интеграции сигналов от поврежденной ДНК и ихдальнейшей передаче к разнообразным эффекторам играют специфическиепротеинкиназы ATM (Ataxia-Telangiectasia Mutated), ATR (ATM Related),NBS1, CHK1 и CHK2 (чекпойнткиназы 1, 2) - Рис. 7. Белок ATM, имеющийструктурное сходство с фосфатидилинозит-3-киназой (PI3K), накапливаетсяв местах повреждений и приобретает киназную активность, связываяфосфорилированные белки хроматина (H2AX и др.) и белки-сенсорынарушений структуры ДНК. Причем, ATM активируется в ответ на возникновениедвунитевых разрывов ДНК (вызываются g-облучением, ингибиторамитопоизомераз и т.д.), тогда как другие нарушения структуры ДНК(например, сшивки оснований, вызываемые УФ-облучением или повреждения,индуцируемые алкилирующими соединениями) не активирует ATM. Вэтих случаях, как и при ингибировании синтеза ДНК, наблюдаетсяфункциональная активация гомолога ATM, белка ATR. Активированныеформы ATM и ATR фосфорилируют ряд своих мишеней, в частности р53(см. раздел 3.3.3), Mre11, NBS1, CHK1, CHK2 и BRCA1 (Рис. 7).

Рис. 7. Схема сигнальных путей, регулирующих реакции клетки наповреждения ДНК. Выделены компоненты, герминальные мутации которыхответственны за наследственные синдромы, характеризующиеся предрасположенностьюк развитию определенных новообразований.

Причем для фосфорилирования CHK2 необходимо предварительное фосфорилированиебелков комплекса Mre11/NBS1/Rad50, который, локализуясь в местахповреждений, рекрутирует к ним различные молекулы, в том числеCHK2, BRCA1, E2F и PCNA. Привлечение PCNA вызывает переключениес репликативного синтеза ДНК на репарационный и остановку клеточногоцикла в S фазе- к блокированию входа и продвижения по S ведети подавление функции E2F (см. 3.2.2). Фосфорилированные чекпойнткиназыCHK1/2, в свою очередь, фосфорилируют и инактивируют белки семействаCdc25, что вызывает подавление активности регулируемых ими циклинзависимыхкиназ и быструю остановку клеточного цикла в G1 (если Cdc25A неактивирует Cdk2) или в G2 (когда Cdc25C не активирует Cdc2). Крометого, CHK1 и CHK2 амплифицируют сигналы к р53 и BRCA1, что способствуетдлительной задержке в G1 или G2 (см. разделы 3.3.3 и 3.11.2) и,кроме того, активизирует системы репарации ДНК (см. следующиеразделы) - Рис.7.

Герминальные инактивирующие мутации обоих аллелей гена ATM вызываютатаксию-телангиэктазию (АТ) - тяжелое заболевание, характеризующеесянейродегенерацией, иммунодефицитом и повышенным риском возникновенияновообразований. Примерно у 10% пациентов с АТ в молодом возрастеразвиваются лимфоидные опухоли из Т- или В-клеток (лимфосаркомы,лимфогрануломатоз, различные формы лейкозов), а также рак молочнойжелезы. Соматические гомозиготные мутации гена АТМ характерныи для некоторых форм ненаследственных лимфолейкозов (Т-клеточногопролимфоцитарного лейкоза, В-клеточного хронического лимфолейкозаи др.). Гомозиготный нокаут гена ATM у мышей также значительноувеличивает вероятность развития лимфоидных неоплазий. У индивидуумовс герминальными мутациями только одного из двух аллелей гена АТМнесколько повышена частота возникновения рака молочной железы.Онкогенный потенциал мутаций АТМ связан, очевидно, с нарушениямиреакций клетки на повреждения ДНК и возникающей в связи с этимгенетической нестабильностью. Так, после g-облучения в клеткахс дефектным АТМ не происходит полноценной активации чекпойнтови остановки клеточного цикла в G1, S или G2. Кроме того, в нихблокирована активизация системы репарации двунитевых разрывовДНК. В результате при инактивации АТМ резко увеличивается вероятностьразмножения клеточных вариантов с различными генетическими нарушениями.

Сходные последствия наблюдаются и при инактивации одной из важнейшихмишеней АТМ - белка NBS1. Герминальные гомозиготные мутации генаNBS1 вызывают Ниймегенский синдром (Nijmegen Breakage Syndrome),характеризующийся иммунодефицитом, генетической нестабильностьюи повышенной предрасположенностью к развитию лимфоидных новообразований(в отличие от мутаций АТМ, мутации NBS1 не вызывают атаксию ителангиэктазию). Соматические мутации гена NBS1 выявляются в 10-20%случаев ненаследственных форм острого лимфобластного лейкоза.В клетках с инактивацией NBS1 наблюдается отмена остановки в Sпосле g-облучения и понижение эффективности работы систем репарациидвунитевых разрывов ДНК вследствие нарушения функционированиякомплекса Rad50/Mre11/NBS1, обеспечивающего оба механизма исправлениятаких повреждений - гомологичную рекомбинацию ДНК и воссоединениеконцов разорванной ДНК.

Потенциальным онкогенным эффектом обладают, по-видимому, и нарушенияфункции белка ATR. Гетерозиготный нокаут гена ATR у мышей приводитк увеличению частоты возникновения лимфосарком, фибросарком, раковпечени и яичника (инактивация обоих аллелей гена ATR, в отличиеот гомозиготного нокаута гена ATM, вызывает внутриутробную гибель).У людей наследственного предрасположения к развитию каких-либоновообразований, связанного с врожденными мутациями ATR пока невыявлено, но соматические мутации этого гена нередко выявляютсяв клетках некоторых опухолей, в частности рака желудка.

Увеличение риска развития новообразований наблюдается и при врожденныхмутациях чекпойнткиназы CHK2. Оказалось, что у части пациентовс клиническими проявлениями синдрома Ли-Фраумени (см. раздел 3.3.1),но не имеющих мутаций р53, выявляются герминальные гетерозиготныемутации гена CHK2. Этот факт свидетельствует о ключевой роли нарушенийсигнального пути CHK2-p53, контролирующего реакции клетки на поврежденияДНК, в возникновении сильной предрасположенности к развитию самыхразных новообразований. Соматические инактивирующие мутации чекпойнткиназCHK2 и CHK1 обнаруживаются в части случаев наиболее распространенныхопухолей: рака легкого, толстой кишки, матки и др.

3.11.2. BRCA1 и BRCA2 контролируют репарацию ДНК и размножениеклеток

Гены BRCA1 и BRCA2 были впервые идентифицированы как гены, врожденныемутации которых ассоциированы с наследственными формами рака молочнойжелезы. У женщин с герминальными мутациями одного из аллелей генаBRCA1 риск развития в течение жизни рака молочной железы составляетоколо 85% (этот риск несколько варьирует в зависимости от местоположенияи/или типа мутаций). Для опухолей яичника такой риск несколькоменьше - около 50%. У носителей врожденных мутаций гена BRCA1выше также вероятность развития опухолей толстого кишечника ипростаты. При герминальных мутациях гена BRCA2 риск развития опухолеймолочной железы несколько ниже, чем при мутациях BRCA1. Отличительнымичертами мутаций BRCA2 являются более частое возникновение ракамолочной железы у мужчин и меньший риск развития опухолей яичника.Гены BRCA1 и BRCA2 ведут себя как классические опухолевые супрессоры:для инициации опухолевого роста помимо врожденной мутации в одномиз аллелей необходима и инактивация второго аллеля, которая происходитуже в соматической клетке. Как правило, мутации в генах BRCA1и BRCA2 ведут к прекращению синтеза полноразмерного белка. Особенностьюмутаций генов BRCA1 и BRCA2 является то, что они характерны длянаследственных форм новообразований и значительно реже обнаруживаютсяв ненаследственных опухолях той же локализации.

Гены BRCA1 и BRCA2 кодируют ядерные фосфобелки (соответственно1863 и 3495 аминокислот), которые за счет разнообразных белок-белковыхвзаимодействий участвуют в регуляции репарации ДНК и размноженияклеток. Так, белок BRCA1 связывает белки, ответственные за гомологичнуюрекомбинацию и репарацию двунитевых разрывов ДНК (Rad50, Rad51,BRCA2), компоненты систем репарации неспаренных оснований ДНК(MSH2, MSH6, MLH1, ATP-MSH2 и др.), транскрипционные факторы (базальные- HDAC, р300/CBP, SWI/SNF- и сиквенс-специфические - p53, Myc,E2F, ZBRK1, ATF, рецептор эстрогенов, рецептор андрогенов), атакже ряд других белков - pRb (см. II.3.2), BARD1 (опосредуетубиквитинирование), BAP1 (ответственен за деубиквитинирование),Nm23 (компонент центросомы) и т.д.

Транскрипционная функция BRCA1 заключается в его способностирепрессировать одни сиквенс-специфические факторы транскрипции(Myc, E2F, рецептор эстрогенов и др.) и активировать другие (р53и др.) и модулировать таким образом активность генов, регулируемыхэтими факторами. При генотоксических стрессах (g-облучение и др.)транскрипционная функция BRCA1 направлена на индукцию остановкиклеточного цикла по нескольких механизмам. Так, она обеспечиваетусиление активности р53- включение дублирующих, р53-независимых,путей активации некоторых р53-респонсивных генов (p21Waf1/Cip1,GADD45), вызывающих задержку соответственно в G1 и G2 (см. раздел3.3.3)- подавление активности Myc, E2F и т.д. Одновременно активированныйBRCA1, взаимодействуя с белками репарационных систем, стимулируетвосстановление нормальной структуры ДНК. Рекрутируя комплексыRad50/Mre11/NBS1, он стимулирует процессирование концов разорваннойДНК, подготавливая их либо для гомологичной рекомбинации, либодля воссоединения "конец в конец" - двух основных путейрепарации двунитевых разрывов ДНК. Взаимодействуя с комплексомRad51/BRCA2, он увеличивает эффективность процесса гомологичнойрекомбинации ДНК. Связываясь с белками MSH2, MSH3, MSH6 и др.,BRCA1 участвует, очевидно, также и в работе системы репарациинеспаренных оснований (исправляет ошибки репликации ДНК и неправильнуюрепарацию двунитевых разрывов ДНК) - см. раздел 3.11.3.

Помимо контроля повреждений ДНК и поддержания целостности геномаBRCA1 выполняет и ряд других функций. Так, он связывает рецепторэстрогенов и репрессирует его транскрипционную функцию, сдерживая,таким образом, избыточную пролиферацию клеток молочной железыи других эстроген-зависимых органов, в частности при половом созреваниии беременности. Кроме того, BRCA1, взаимодействуя с компонентамицентросом (Nm23 и др.), принимает участие в обеспечении правильнойсегрегации хромосом во время митоза.

Исходя из столь многочисленных функций BRCA1, становятся понятнымипоследствия его инактивации. В клетках с дефектным BRCA1 наблюдаетсясильная генетическая нестабильность, т.е. повышение частоты возникновенияспонтанных или индуцированных мутагенами генетических изменений- генных мутаций, хромосомных транслокаций, анеуплоидии и т.д.Кроме того, отменяется сдерживание пролиферации эстроген-зависимыхклеток, что и объясняет, очевидно, возникновение опухолей именномолочной железы и яичника.

Функции белка BRCA2 изучены хуже. Как и BRCA1 он обладает репарационнымии транскрипционными активностями. Связывая Rad51 (гомолог бактериальногобелка RecA), BRCA2 увеличивает его способность катализироватьрекомбинации ДНК, обеспечивающие репарацию двунитевых разрывовДНК. Транскрипционная функция BRCA2 связана, очевидно, со способностьюрекрутировать P/CAF (p300/CBP Associated Factors), ацетилирующиегистоны и ремоделирующие хроматин. Однако физиологические гены-мишениBRCA2 пока не идентифицированы. Тем не менее о важности транскрипционнойактивности BRCA2 для его супрессорной функции может свидетельствоватьтот факт, что обнаруживаемые в опухолях молочной железы мутациипоражают именно транскрипционный домен. У мышей гомозиготный нокаутрезко уменьшает жизнеспособность эмбрионов, а у выживших животныхразвиваются злокачественные тимомы. На клеточном уровне инактивацияBRCA2 приводит к гиперчувствительности к различным генотоксическимагентам (УФ- и g-облучению, химическию мутагенам), повышению частотывстречаемости незарепарированных двунитевых разрывов ДНК и различныхперестроек хромосом. Механизмы специфического возникновения упациентов с герминальными мутациями BRCA2 опухолей молочной железы,яичника и простаты пока не установлены.

3.11.3. MSH2, MSH6, MLH1 и PMS2 - компоненты систем репарациинеспаренных оснований ДНК

Риск развития новообразований значительно повышается и при врожденныхдефектах системы репарации неспаренных оснований (mismatch repair),исправляющей главным образом ошибки репликации ДНК и неточностирепарации двунитевых разрывов. В результате таких ошибок и потерикомплементарности нитей ДНК возникают петли, которые распознаютсякомплексами белков MSH2/MSH6 или MSH2/MSH3 (они отличаются поспособности узнавать разные типы петель, образующиеся при заменеоснований, инсерциях и делециях). Эти комплексы рекрутируют кместам с нарушенной структурой ДНК комплексы белков MLH1/PMS2или MLH1/MLH3, которые, в свою очередь, привлекают экзо- и эндонуклеазы,осуществляющие эксцизию аномального фрагмента ДНК, а также факторырепликации (PCNA, ДНК-полимеразы), обеспечивающие застройку брешии восстановление нормальной структуры ДНК.

Врожденные гетерозиготные мутации по меньшей мере четырех изкомпонентов этой системы - MSH2, MLH1, MSH6 и PMS2 - вызываютсиндром Линча. Главной чертой этого синдрома является развитиев молодом возрасте опухолей толстой кишки (так называемый наследственныйнеполипозный колоректальный рак) и/или опухолей яичника. Преимущественноевозникновение опухолей кишечника, вероятно, связано с высочайшимпролиферативным потенциалом клеток на дне кишечных крипт, чтоестественно ведет и к более частому появлению ошибок репликации,которые должны исправляться именно системами репарации неспаренныхоснований. Естественно, что бурно размножающиеся полустволовые(амплифицирующие) клетки кишечного эпителия накапливают необходимыйдля развития опухолей набор мутаций быстрее, чем медленно размножающиесяклетки.

Возникновение опухолей при дисфункции MSH2, MLH1, MSH3 или PMS2связано, очевидно, с повышенной вероятностью мутаций в протоонкогенахи опухолевых супрессорах. Действительно, при мутациях гена MSH2или MLH1 частота точечных мутаций во всех локусах увеличиваетсяна 1-2 порядка, а в наследственных колоректальных раках, как правило,обнаруживаются точечные мутации в генах b-катенина, АРС, TbR-II,Smad2, Smad4 и т.д., которые, по-видимому, и являются причинойразвития новообразований. Маркером инактивации любого из геноврепарации неспаренных оснований является легко выявляемая нестабильностьмикросателлитных последовательностей ДНК. Нарушения функции геновMSH2, MLH1, MSH3, MSH6 и PMS2, приводящие к нестабильности микросателлитов,характерны и для некоторых форм спорадических (ненаследственных)опухолей: они обнаруживаются в 13-15% опухолей толстой кишки,рака желудка и эндометрия, но значительно реже (<2%) в другихновообразованиях.

Описаны единичные случаи герминальных мутаций обоих аллелей генаMLH1, которые приводили к развитию еще во внутриутробном возрастелимфосарком, лейкозов и нейрофиброматоза. Это объясняется видимотем, что при полной инактивации системы репарации ошибок репликацииДНК и бурном размножении в эмбриогенезе клеток всех тканей, необходимоедля образования опухоли количество мутаций успевает накопитьсяв каких-то клетках задолго до рождения, тогда как при гетерозиготныхмутациях темп мутирования ниже и накопление мутаций до критическогоуровня продолжается в интенсивно размножающихся клетках взрослогоорганизма. С этой точки зрения пока непонятно, почему у мышейкак с гетерозиготным, так и с гомозиготным нокаутом гена MSH2или гена MLH1, также развиваются лимфомы и саркомы, а не опухоликишечника. (Впрочем, следует заметить, что мыши сильно отличаютсяот человека и по типу спонтанно развивающихся опухолей: у человекабольшую часть новообразований представляют различные формы рака,возникающие из эпителиоцитов, тогда как у мышей такие опухолидостаточно редки, а возникают, как правило, лимфомы и саркомы).Природу таких различий еще предстоит выяснить.

3.11.4.Компоненты системы эксцизионной репарации ДНК и пигментнаяксеродерма

Система эксцизионной репарации узнает и исправляет сшивки оснований(тиминовые димеры и др.), образующиеся, например, после УФ-облученияили оксидативного стресса. Она включает множество компонентов.Распознавание тиминовых димеров осуществляется белковым комплексомXPC-hHR23, который вызывает рекрутирование к месту поврежденияфактора TFIIH - сложного белкового комплекса, состоящего из 9субъединиц и обладающего разными активностями, в том числе хеликазнойи транскрипционной. Привлеченный фактор TFIIH катализирует раскрытиеповрежденного участка ДНК и способствует сборке репарационногокомплекса. Затем к дефектному участку последовательно рекрутируютсябелки XPG, XPA, комплекс RPA и, наконец, белки XPF-ERCC1, являющиесяэндонуклеазами. Именно они и осуществляют эксцизию поврежденногоучастка ДНК (обычно вырезается 24-32 нуклеотида) и инициируютзастройку бреши по неповрежденной матрице и восстановление нормальнойструктуры ДНК.

Герминальные гетерозиготные мутации компонентов системы эксцизионнойрепарации, в частности генов XPA, XPB, XPC, XPD, XPF, XPG, ведутк возникновению пигментной ксеродермы - наследственного заболевания,характеризующегося повышенной чувствительностью к ультрафиолетовомуоблучению и развитием множественных опухолей кожи на местах, подвергающихсясолнечному облучению. Интересно, что, несмотря на участие эксцизионнойрепарации в исправлении дефектов, вызванных не только УФ-облучением,но и мутагенами/канцерогенами, частота возникновения других формопухолей при пигментной ксеродерме почти не увеличивается. Приэтом у трансгенных мышей с аналогичными дефектами системы эксцизионнойрепарации отмечается повышение частоты индукции новообразованийхимическими канцерогенами. Преимущественное возникновение у пациентовс пигментной ксеродермой исключительно опухолей кожи может указыватьна незначительную роль химических факторов, загрязняющих окружающуюсреду, в развитии опухолей внутренних органов у человека.

Заключение

К настоящему времени идентифицировано несколько десятков генов,инактивация которых приводит к развитию новообразований. Большинствоиз них, регулируя клеточный цикл, апоптоз или репарацию ДНК, предотвращаютнакопление в организме клеток с генетическими и некоторыми другимианомалиями. Выявлены опухолевые супрессоры и с другими функциями,в частности, контролирующие морфогенетические реакции клетки иангиогенез. Обнаруженные гены далеко не исчерпывают список существующихопухолевых супрессоров. Уже сейчас в хромосомах человека картированоболее сотни участков, закономерно делетирующихся при различныхновообразованиях и, следовательно, содержащих потенциальные опухолевыесупрессоры. Их идентификация, вероятно, приведет к обнаружениюи других путей подавления опухолевого роста. В ближайшем будущемможно ожидать также успехов в прикладном использовании знанийоб опухолевых супрессорах. Здесь следует надеяться, во-первых,на разработку высокоточных методов диагностики наследственныхсиндромов, предрасполагающих к развитию новообразований, а во-вторых,на создание принципиально новых методов терапии злокачественныхновообразований, основанных на модификации сигнальных путей, контролируемыхопухолевыми супрессорами.

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров:ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза. Биохимия, 2000,65, 5-33.

2. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью.Биохимия, 2000, 65, 34-47.

3. The Genetic Basis of Human Cancer. Eds Vogelstein B., Kinzler,K.W. McGraw Hill, New York, 1998.

4. Gray, J. W. & Collins, C. Genome changes and gene expressionin human solid tumors. Carcinogenesis, 2000, 21, 443-452.

5. Hanahan D., Weinberg R.A. The hallmarks of cancer. Cell, 2000,100, 57-70.

6. Levine A. J. The tumour suppressor genes. Annu. Rev. Biochem.,1993, 62, 623-651.

7. Weinberg R.A. The molecular basis of oncogenes and tumor suppressorgenes. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1995, 758, 331-338.

8. Hooper M.L. Tumour suppressor gene mutations in humans andmice: parallels and contrasts. EMBO J., 1998, 17, 6783-6789.

9. Ghebranious N., Donehower L.A. Mouse models in tumor suppression.Oncogene, 1998, 17, 3385-3400.

10. Knudson, A. G. Mutation and cancer: statistical study ofretinoblastoma. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 1971, 68, 820-823.

11. Grana X., Garriga J., Mayol X. Role of the retinoblastomaprotein family, pRb, p107 and p130 in the negative control ofcell growth. Oncogene, 1998, 17, 3365-3383.

12. Lipinski M.M., Jacks T. The retinoblastoma gene family indifferentiation and development. Oncogene, 1999, 18, 7873-7882.

13. Harbour J.W., Dean D.C. The Rb/E2F pathway: expanding rolesand emerging paradigms. Genes Dev., 2000, 14, 2393-2409.

14. Paggi M.G., Giordano A. Who is the boss in the retinoblastomafamily? The point of view of Rb2/p130, the little brother. CancerRes., 2001, 61, 4651-4654.

15. Vogelstein B., Lane D., Levine A. Surfing the p53 network.Nature, 2000, 408, 307-310.

16. Levine A.J. p53, the celular gatekeeper for growth and division.Cell, 1997, 88, p.323 - 331.

17. Woods, D. B. & Vousden, K. H. Regulation of p53 function.Exp. Cell Res., 2001, 264, 56-66.

18. Prives, C. and Hall, P.A. The p53 pathway. J. Path., 1999,187, 112-126.

19. Sionov R.V., Haupt, Y. The cellular response to p53: thedecision between life and death. Oncogene, 1999, 18, 6145 - 6157.

20. Yang A, McKeon F. p63 and p73: p53 mimics, menaces and more.Nat. Rev. Mol. Cell. Biol., 2000, 1, 199-207.

21. Sherr C. J. & Weber, J. D. The ARF/p53 pathway. Curr.Opin. Genet. Dev., 2000, 10, 94-99.

22. Ruas M., Peters G. The p16INK4a/CDKN2A tumor suppressor andits relatives. Biochem. Biophys. Acta, 1998, 1378, F115-F177.

23. Sherr C. J. Parsing Ink4a/Arf: "pure" p16-nullmice. Cell, 2001, 106, 531-534.

24. Maehama, T. & Dixon, J. E. PTEN: a tumour suppressorthat functions as a phospholipid phosphatase. Trends Cell Biol.,1999, 9, 125-128.

25. Bonneau, D. & Longy, M. Mutations of the human PTEN gene.Hum. Mutat., 2000, 16, 109-122.

26. Polakis P. The adenomatous polyposis coli (APC) tumor suppressor.Biochim.Biophys. Acta, 1997, 1332, F127-F147.

27. Polakis P. The oncogenic activation of b-catenin. Curr. Opin.Genet. Dev., 1999, 9, 15-21.

28. Polakis P. Wnt Signaling and cancer. Genes Dev., 2000, 14,1837-1851.

29. Polakis P. More than one way to skin a catenin. Cell, 2001,105, 563-566.

30. Taipale J., Beachy P.A. The Hedgehog and Wnt signaling pathwaysin cancer. Nature, 2001, 411, 3503-354.

31. Bienz M., Clevers H. Linking colorectal cancer to Wnt signaling.Cell, 2000, 103, 311-320.

32. Massague J., Blain S.W., Lo R.S. TGFb signaling in growthcontrol, cancer, and heritable disorders. Cell, 2000, 103, 295-309.

33. Massague J. How cells read TGF-? signals. Nature Rev. Mol.Cell Biol., 2000, 1, 169-178.

34. Blagosklonny M.V. Do VHL and HIF-1 mirror p53 and Mdm-2?Degradation-transactivation loops of oncoproteins and tumor suppressors.Oncogene, 2001, 20, 395-398.

35. Gutmann D.H., Hirbe A.C., Haipek C.A. Functiomal analysisof neurofibromatosis 2 (NF2) missense mutations. Hum. Mol.Genet.,2001, 10, 1519-1529.

36. Kinzler, K. W. & Vogelstein, B. Gatekeepers and caretakers.Nature 386, 1997, 761-763.

37. Zhou B.-B.S., Elledge S.J. The DNA damage response: puttingcheckpoints in perspective. Nature, 2000, 408, 433-439.

38. Lengauer C., Kinzler K.W., Vogelstein B. Genetic instabilitiesin human cancers. Nature, 1998, 396, 643-649.

39. Ponder B.A.J. Cancer genetics. Nature, 2001, 411, 336-341.

40. Shiloh, Y. Ataxia-telangiectasia and the Nijmegen breakagesyndrome: related disorders but genes apart. Annu. Rev. Genet.,1997, 31, 635-662.

41. Kastan M.B., Lim D.S. The many substrates and functions ofATM. Nature Rev. Mol. Cell. Biol., 2000, 1, 179-186.

42. Walworth N.C. Cell-cycle checkpoint kinases: checking inon the cell cycle. Curr. Opin. Cell Biol., 2000, 12, 697-704.

43. Welsh P.A., King M.-C. BRCA1 and BRCA2 and the genetics ofbreast and ovarian cancer. Hum. Mol.Genet., 2001, 10, 705-713.

44. Zheng L., Li S., Boyer T.G., Lee W.-H. Lessons learned fromBRCA1 and BRCA2. Oncogene, 2000, 19, 6159-6175.

45. Wang Q., Zhang H., Fishel R., Greene M.I. BRCA1 and cellsignaling. Oncogene, 2000, 19, 6152-6158.

46. Kolodner R.D., Marsischky G.T. Eukaryotic DNA mismatch repair.Curr. Opin.Genet. Dev., 1999, 9:89-96.

47. de Laat W.L., Jaspers N.G.J., Hoeijmakers J.H.J. Molecularmechanism of nucleotide excision repair. Gen. Dev., 1999, 13,768-785.

48. Lehman A.R. The xeroderma pigmentosum group D (XPD) gene:one gene, two functions, three diseases. Gen. Dev., 2001, 15,15-23.