Концентрация фибриногена в плазме, в крови

Он является субстратом коагуляции, а его аномалии обусловливают геморрагии и тромботические нарушения. Кроме того, этот крупномолекулярный протеин является белком острой фазы, поэтому его определение нередко используют для оценки выраженности воспаления и контроля эффективности лечения различных по патогенезу заболеваний.

Принцип метода

Принцип метода A. Ciauss (1957) основан на определении скорости коагуляции разведенной (1:10) БТП после добавления тромбина с активностью около 100 NIH/ml. Поскольку в тестируемую смесь добавляют значительный избыток тромбина, скорость образования сгустка зависит прежде всего от уровня фибриногена. Концентрацию фибриногена определяют по калибровочной кривой, которую строят по результатам исследования разведенных образцов плазмы с известным содержанием фибриногена. Для определения уровня фибриногена с помощью метода Ciauss необходим коагулометр.

Реактивы и оборудование

• Тромбиновый реагент (около 100 NIH/ml).
• Буферный раствор.
• Калибровочный образец БТП.
• Коагулометр.

Оценка результатов исследования

На основе результатов времени коагуляции разведенной исследуемой БТП определяют концентрацию фибриногена по калибровочной кривой. Большинство коагулометров вычисляют концентрацию фибриногена (в граммах на литр или миллиграммах на децилитр) автоматически и позволяют распечатать на принтере полученный результат. В тех случаях, когда фибриноген в исследуемой плазме превышает концентрацию в первом калибровочном образце, БТП следует развести (1:20), а затем повторно уточнить время свертывания и определить концентрацию по калибровочной кривой (полученный результат в граммах на литр необходимо умножить на 2). Если же фибриноген ниже концентрации в третьем калибровочном образце, то исследуемую плазму следует развести (1:5) и повторно определить время свертывания, а полученный результат, выраженный в граммах на литр, уменьшить в 2 раза.

Интерпретация результатов исследования

Выраженность нарушений в лабораторных тестах отличается при разном уровне фибриногена. При генетически обусловленной гипофибриногенемии выраженность нарушения свертывания крови в лабораторных тестах меньше, чем при патологии печени, поскольку при гепатитах и циррозах наблюдается дисфункция коагуляции за счет сочетанного дефекта синтеза проакцелерина и нарушения карбоксилирования факторов протромбинового комплекса (II, X, VII, IX).

Гиперфибриногенемия встречается при патологии инфекционной этиологии, онкологических, сердечно-сосудистых и многих других заболеваниях. Определение уровня фибриногена часто используют для оценки выраженности воспаления и контроля эффективности лечения различных по патогенезу заболеваний.

Причины ошибок

• Ошибки преаналитического этапа исследования.
• Неточное значение фибриногена в калибровочном образце плазмы.
• Использование нестабильного тромбина.
• Отсутствие системы внутреннего контроля качества.

Другие аналитические технологии

Длительное время применяли (в настоящее время считается устаревшим и не рекомендуется к использованию) гравиметрический метод по Р.А. Рутберг, основанный на вычислении концентрации фибриногена по массе сгустка редко фибрина, выделенного из 1 мл цитратной плазмы. Фотометрический метод В.А. Белицер и соавт. предполагает определение фибриногена после его коагуляции тромбином в смеси с ионами кальция и монойодацетата (после инактивации фактора XIII монойодацетатом сгусток фибрина становится растворимым в уксусной кислоте, что препятствует включению в него посторонних плазменных белков). Существует модифицированный хронометрический метод A. Ciauss с использованием ингибитора полимеризации Pefabloc FG. При использовании последнего существуют проблемы при определении низких концентраций фибриногена. Дополнительно разработаны иммунологические методики оценки уровня фибриногена.